一、產(chǎn)品簡介

1. 產(chǎn)品名稱：大鼠肺血管平滑肌細胞

2. 產(chǎn)品編號：MZ-M0183

2. 組織來源：肺組織

3. 產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4. 細胞簡介：大鼠肺血管平滑肌細胞分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能：①細胞表面表達介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應；②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細胞。大鼠肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動脈高壓；②先天性肺動脈狹窄；③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素，最新研究表明肺血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應，并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關。

明舟生物生產(chǎn)的大鼠肺血管平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5. 培養(yǎng)基信息：

DMEM[H]、FBS、平滑肌細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

我們推薦使用大鼠肺血管平滑肌細胞專用完全培養(yǎng)基作為體外培養(yǎng)大鼠肺血管平滑肌細胞的培養(yǎng)基。

二、使用方法：

在明舟生物技術部標準操作流程下，大鼠肺血管平滑肌細胞可傳8代左右，隨著傳代次數(shù)的增加，細胞會呈現(xiàn)老化狀態(tài)，生長速度減緩，4代以內(nèi)細胞狀態(tài)最佳；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。

三、產(chǎn)品的運輸和保存：

視天氣狀況和運輸距離遠近，明舟生物與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)   1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)   T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

四. 細胞傳代

1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化；

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

五、注意事項：

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和明舟生物技術部溝通；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

5. 該細胞只可用于科研