| 產(chǎn)品名稱 |
人宮頸癌組織源性原代細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4280 |
| 組織來(lái)源 |
中國(guó)成年病人手術(shù)后的宮頸癌組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長(zhǎng)特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
鱗狀上皮細(xì)胞癌，約占90％～95％。 腺癌僅占5％～10％ |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分型 |
1、目觀在發(fā)展為浸潤(rùn)癌前，肉眼觀察無(wú)特殊異常，或類似一般宮頸糜爛。隨著浸潤(rùn)癌的 出現(xiàn)，宮頸可表現(xiàn)以下四種類型： （1）糜爛型：環(huán)繞宮頸外口表面有粗糙的顆粒狀糜爛區(qū)，或有不規(guī)則的潰破面、觸及易出 血。 （2）外生型：又稱增生型或菜花型。由息肉樣或乳頭狀隆起，繼而發(fā)展向陰道內(nèi)突出的大 小不等的菜花狀贅生物，質(zhì)脆易出血。 （3）內(nèi)生型：又稱浸潤(rùn)型。癌組織宮頸深部組織浸潤(rùn)、宮頸肥大而硬，但表面仍光滑或僅 有淺表潰瘍。 （4）潰瘍型：不論外生型或內(nèi)生型進(jìn)一步發(fā)展后，癌組織壞死脫落，形成潰瘍，甚至整個(gè) 子宮頸為一大空洞所替代，因常有繼發(fā)性感染，故有惡臭的分泌物排出。子宮頸癌尤其是腺 癌也可向頸管內(nèi)生長(zhǎng)，使子宮頸成桶狀增大，這也是內(nèi)生型的一種。 2、鏡查 （1）不典型增生：不典型增生表現(xiàn)為底層細(xì)胞增生，底層細(xì)胞不但增生，而且有細(xì)胞排列 紊亂及細(xì)胞核增大、濃染、染色質(zhì)分布不均等核異質(zhì)改變。 ①輕度不典型增生(間變I 級(jí))：上皮細(xì)胞排列稍紊亂，細(xì)胞輕度異型性，異型上皮占據(jù)上皮 層的下三分之一。②中度不典型增生(間變Ⅱ級(jí))：上皮細(xì)胞排列紊亂，異型性明顯，異型上皮占據(jù)上皮層的下 三分之二。 ③重度非典型增生(間變Ⅲ級(jí))：幾乎全部上皮極性紊亂或極性消失，細(xì)胞顯著異型性和原位 癌已不易區(qū)別。 （2）原位癌：又稱上皮內(nèi)癌。上皮全層極性消失，細(xì)胞顯著異型，核大，深染，染色質(zhì)分 布不均，有核分裂相。但病變?nèi)韵抻谏掀觾?nèi)，未穿透基底膜，無(wú)間質(zhì)浸潤(rùn)。異型細(xì)胞還可 沿著宮頸腺腔開(kāi)口進(jìn)入移行帶區(qū)的宮頸腺體，致使腺體原有的柱狀細(xì)胞為多層異型鱗狀細(xì)胞 所替代，但腺體基底膜仍保持完整，這種情況稱為宮頸原位癌累及腺體。 （3）鏡下早期浸潤(rùn)癌：鏡下早期浸潤(rùn)癌在原位癌基礎(chǔ)上，偶然可發(fā)現(xiàn)有癌細(xì)胞小團(tuán)已穿破 基底膜，似淚滴狀侵入基底膜附近的間質(zhì)中，浸潤(rùn)的深度不超過(guò)5mm，寬不超過(guò)7mm，也 無(wú)癌灶互相融合現(xiàn)象，也無(wú)侵犯間質(zhì)內(nèi)脈管跡象時(shí)，臨床上無(wú)特征。 （4）鱗狀上皮浸潤(rùn)癌：當(dāng)癌細(xì)胞穿透上皮基底膜，侵犯間質(zhì)深度超過(guò)5mm，稱為鱗狀上皮 浸潤(rùn)癌。在間質(zhì)內(nèi)可出現(xiàn)樹(shù)枝狀、條索狀，彌漫狀或團(tuán)塊狀癌巢。 ①I(mǎi) 級(jí)：分化好。癌巢中有相當(dāng)數(shù)量的角化現(xiàn)象，可見(jiàn)明顯的癌珠。 ②Ⅱ級(jí)：中等分化(達(dá)宮頸中層細(xì)胞的分化程度)，癌巢中無(wú)明顯角化現(xiàn)象。 ③Ⅲ級(jí)：未分化的小細(xì)胞(相當(dāng)于宮頸底層的未分化細(xì)胞)。 （5）腺癌：腺癌來(lái)源于被覆宮頸管表面和頸管內(nèi)腺體的柱狀上皮。鏡檢時(shí)，可見(jiàn)到腺體結(jié) 構(gòu)，甚至腺腔內(nèi)有乳頭狀突起。腺上皮增生為多層，細(xì)胞低矮，異型性明顯，可見(jiàn)核分裂相。 如癌細(xì)胞充滿腺腔，以致找不到原有腺體結(jié)構(gòu)時(shí)，往往很難將腺癌與分化不良的鱗癌區(qū)別。 如腺癌與鱗癌并存時(shí)稱為宮頸腺、鱗癌。腺、鱗癌惡性程度高，轉(zhuǎn)移早、預(yù)后差。 |
